| NAD-蘋(píng)果酸脫氫酶（NAD-MDH）測(cè)試盒 |
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價(jià)格：28000 元(人民幣) | 產(chǎn)地：本地 |
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| 上架時(shí)間：2021-09-15 18:01:03 | 瀏覽量：31 | |
上海仁捷生物科技有限公司
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測(cè)定意義：MDH （EC 1.1.1.37）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，線粒體中MDH 是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一，催化蘋(píng)果酸形成草酰乙酸；相反，胞漿中MDH 催化草酰乙酸形成蘋(píng)果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物， 連接多條重要的代謝途徑。因此，MDH 在細(xì)胞多種生理活動(dòng)中扮演著重要的角色，包括線粒體的能量代謝、蘋(píng)果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性，MDH 分為NAD-依賴(lài)的MDH 和NADP-依賴(lài)的MDH，細(xì)菌中通常只含有NAD-MDH，在真核細(xì)胞中，NAD-MDH 分布于細(xì)胞質(zhì)和線粒體中。 測(cè)定原理：NAD-MDH 催化NADH 還原草酰乙酸生成蘋(píng)果酸，導(dǎo)致340nm 處光吸收下降。 需自備的儀器和用品：紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL 石英比色皿和蒸餾水。 注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者 增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
樣本處理 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心棄上清，按照每 200 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 400μL 提取液， 超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率 20%，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次），8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待 測(cè)。 組織：稱(chēng)取約 0.05g 組織，加入 1mL 提取液進(jìn)行冰浴勻漿；8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。 血清（漿）樣本：直接檢測(cè)。
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