品牌 | 仁捷生物(RENJIEBIO) | 用途 | 僅用于科研實驗 | 材質(zhì) | 盒裝液體 | 型號 | 100管/48樣 | 產(chǎn)地 | 上海 |
測定意義:還原糖廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中。植物體內(nèi)的還原糖主要包括葡萄糖、果糖和麥芽糖等,是最常見的單糖和雙糖,其中葡萄糖和果糖不僅是呼吸作用的主要底物,也是進一步合成蔗糖、淀粉和纖維素的底物。
測定原理:加熱促進堿性溶液中3,5-二硝基水楊酸溶液與還原糖生成棕紅色氨基化合物,在540nm有特征吸收峰;在一定的濃度范圍內(nèi),還原糖含量與540nm吸光度成線性關(guān)系,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,即可求出樣品中還原糖的量。
需要的儀器,耗材:可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、蒸餾水。
樣本處理 1、 細(xì)菌或細(xì)胞的處理:收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(10 4個):試劑一體 積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴, 功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次),轉(zhuǎn)移到有蓋離心管中(防止加熱時水分散失),80℃水 浴中 40min 并且振蕩 8~10 次,8000g,25℃離心 10min,取上清供測定用。
2、 組織的處理:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 試劑 一),冰浴勻漿,轉(zhuǎn)移到有蓋離心管中(防止加熱時水分散失),80℃水浴中 40min 并且振蕩 8~10 次,8000g, 25℃離心 10min,取上清供測定用。
3、 血清(漿)的處理:按照血清(漿)體積(mL):試劑一體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取 0.1mL 血清(漿) 加入 0.9mL 試劑一),冰浴勻漿,轉(zhuǎn)移到有蓋離心管中(防止加熱時水分散失),80℃水浴中 40min 并且振蕩 8~10 次,8000g,25℃離心 10min,取上清供測定用 
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