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異檸檬酸裂解酶（ICL)測(cè)試盒

測(cè)定意義：ICL（EC4.1.3.1）主要存在于植物和微生物中，油料作物種子在萌發(fā)過(guò)程中，通過(guò)乙醛酸循環(huán)及其他過(guò)程將脂肪轉(zhuǎn)變成碳水化合物。ICL是乙醛酸循環(huán)的關(guān)鍵酶之一。

測(cè)定原理：ICL催化異檸檬酸降解為乙醛酸和琥珀酸，乙醛酸和NADH在LDH的作用下生成乙醇和NAD，NADH在340nm下有特征吸收峰，監(jiān)測(cè)340nm吸光度的減小速率可間接反應(yīng)ICL活性。

需要的儀器，耗材:紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水

樣本處理
1、細(xì)菌或細(xì)胞處理：收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照每 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取 液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率 20%，超聲 3 秒，間隔 10 秒，重復(fù) 30 次），15000g，4℃，離心 20 分鐘，取上 清，置冰上待測(cè)。
2、組織處理：稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液進(jìn)行冰浴勻漿；15000g，4℃，離心 20 分鐘，取上清，置 冰上待測(cè)。