| 品牌 | 仁捷生物（RENJIEBIO) | 用途 | 僅用于科研實驗 | | 材質(zhì) | 盒裝液體 | 型號 | 50管/24樣 | | 產(chǎn)地 | 上海 |
測定意義：LDH（EC 1.1.1.27）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，是糖酵解途徑的末端酶，催化丙酮酸與乳酸之間的可逆反應，伴隨著NAD+/NADH之間互變。
測定原理：LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸，丙酮酸進步與2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在堿性溶液中顯棕紅色，顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。
試驗中所需的儀器和試劑：可見分光光度計、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
LDH活力單位計算
1. 標準曲線的繪制：根據(jù)標準管測定值和濃度做標準曲線，y 為標準品濃度，μmol/mL；x 為對吸光度（減去濃 度為 0 的標準管的 OD 值）。
2. 計算樣本丙酮酸的含量，即將ΔA 帶入回歸方程中（x），計算 y 值（μmol/mL）。
3. 血清（漿）LDH 活力的計算 單位的定義：每 mL 血清（漿）每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol 丙酮酸定義為個酶活力單位。 LDH（U/mL）=y×V 樣÷V 樣÷T×10 3=66.7×y
4. 細胞、細菌和組織中 LDH 活力的計算 （1）按樣本蛋白濃度計算： 單位的定義：每 mg 組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生 1 nmol 丙酮酸定義為個酶活力單位。 LDH（U/mg prot）= y×V 樣÷（Cpr×V 樣）÷T×10 3=66.7×y÷Cpr （2）按樣本質(zhì)量計算： 單位的定義：每 g 組織每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol 丙酮酸定義為個酶活力單位。 LDH（U/g 質(zhì)量）= y×V 樣÷（W÷V 樣總×V 樣）÷T×10 3=66.67×y÷W （3）按細菌或細胞密度計算： 單位的定義：每 1 萬個細菌或細胞每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol 丙酮酸定義為個酶活力單位。 LDH（U/10 4 cell）= y×V 樣÷（500÷V 樣總×V 樣）÷T×10 3=0.133×y V 樣：反應體系中加入的樣本體積，50μL=0.05mL；V 樣總：加入的提取液體積，1mL；T：反應時間，15min； Cpr：蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；500：細胞或細菌總數(shù)，500 萬；10 3：單位換算系數(shù)，1μmol/mL=10 3nmol/mL。
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