品牌 | 仁捷生物(RENJIEBIO) | 用途 | 僅用于科研實(shí)驗(yàn) |
材質(zhì) | 盒裝液體 | 型號(hào) | 50管/48樣 |
產(chǎn)地 | 上海 |
NADP-蘋果酸脫氫酶(NADP-MDH)測(cè)試盒實(shí)驗(yàn)科研
產(chǎn)品說明: MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之 ,催化蘋果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物,連接 多條重要的代謝途徑。因此,MDH在細(xì)胞多種生理活動(dòng)中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、蘋果酸- 天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性,MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP -依賴 的MDH,NADP-MDH主要存在于真核細(xì)胞中。 NADP-MDH催化NADPH還原草酰乙酸生成蘋果酸,導(dǎo)致340nm處光吸收下降。
注意:實(shí)驗(yàn)之建議選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者 增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、1mL石英比色皿、研缽/勻漿器、蒸餾水。
樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn)) 1、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),棄上清,按照每 200 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 400μL 提取液, 超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率 20%,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次),8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待 測(cè)。 2、組織:稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液進(jìn)行冰浴勻漿;8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。 3、血清(漿)樣本:直接檢測(cè)。