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γ-谷氨酰半胱氨酸連接酶(GCL)檢測試劑盒操作程序
γ-谷氨酰半胱氨酸連接酶(GCL)檢測試劑盒操作程序 價格:35000  元(人民幣) 產(chǎn)地:本地
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詳細(xì)介紹

品牌仁捷生物(RENJIEBIO)用途僅用于科研實(shí)驗(yàn)
材質(zhì)盒裝液體型號50管/48樣
產(chǎn)地上海

γ-谷氨酰半胱氨酸連接酶(GCL)檢測試劑盒操作程序

產(chǎn)品說明: GCL(glutamate cysteine ligase)是GSH合成的限速酶,GSH對GCL有反饋抑制作用。GCL基因表達(dá)受多種因 素調(diào)節(jié),如氧化劑、抗氧化劑、生長因子和炎癥因子等。GCL活性高低對GSH含量和GSH/GSSG比值有重要影響。 在ATP和Mg 2+存在下,GCL催化谷氨酸和半胱氨酸合成γ-谷氨酰半胱氨酸;同時ATP去磷酸化產(chǎn)生無機(jī)磷分子, 通過測定無機(jī)磷增加速率,即可計算出GCL活性。

注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者 增加樣本量進(jìn)行檢測。


需自備的儀器和用品: 可見分光光度計、冷凍離心機(jī)、水浴鍋、移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、濃硫酸和蒸餾水。

γ-谷氨酰半胱氨酸連接酶(GCL)檢測試劑盒操作程序

注意事項(xiàng): 1、 樣本處理等過程均需要在冰上進(jìn)行,且須在當(dāng)日測定酶活力,以免影響其活力。如果是勻漿液,避免反復(fù)凍 融。 2、 樣本測定前先取 1-2 個樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如吸光值大于 1,應(yīng)先用試劑一(或者生理鹽水)稀釋到適當(dāng)倍數(shù),哺乳動 物組織和血液一般稀釋 3-5 倍。 3、 細(xì)胞中 GCL 活性測定時,細(xì)胞數(shù)目須在 300 萬-500 萬之間,細(xì)胞中 GCL 的提取時可加試劑一(或生理鹽水) 后研磨或超聲波處理,不能用細(xì)胞裂解液處理細(xì)胞。 4、 試劑三配制完成后,請一周內(nèi)使用完。 5、 試劑五配制過程中,可能會產(chǎn)生黑色固體,其不影響結(jié)果,注意吸取時不要將黑色固體吸入。該溶液配制完 成后應(yīng)為淺黃色,若為藍(lán)色則已污染,不可再使用。 6、 測定吸光值時請于水浴后 10-40內(nèi)測完。

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