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檸檬酸合酶(CS）測試盒操作程序

生化檢測可以檢測的樣本類型的：

　　體液：血清(漿)、尿液、唾液等

　　組織：動植物組織

　　食品：果汁、蜂蜜、牛奶、紅酒、巧克力等

　　其它：保健品、化妝品

產(chǎn)品說明： CS（EC 2.3.3.1）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞的線粒體基質(zhì)中，是三羧酸循環(huán)第yi個限速酶， 是三羧酸循環(huán)主要調(diào)控位點之。 CS催化乙酰CoA和草酰乙酸產(chǎn)生檸檬酰輔酶A，進步水解產(chǎn)生檸檬酸；該反應(yīng)促使DTNB轉(zhuǎn)變成黃色的TNB， 在412nm處有特征吸光值。 注意：實驗之建議選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者 增加樣本量進行檢測。 需自備的儀器和用品： 可見分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、研缽/勻漿器、可調(diào)節(jié)移液器、1mL

檸檬酸合酶(CS）測試盒操作程序

樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
1、 組織、細菌或細胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離：

1) 稱取約 0.1g 組織或收集 500 萬細胞，加入 1mL 提取液和 10μL 試劑二，用冰浴勻漿器或研缽勻漿。

2) 將勻漿液 600g，4℃離心 5min。將上清液移至另離心管中，11000g，4℃離心 10min。

3) 上清液即胞漿提取物，可用于測定從線粒體泄漏的 CS。

4) 在沉淀中加入 200μL 試劑和 2μL 試劑二，反復(fù)吹打充分混勻，用于 CS 測定，并用于蛋白濃度測定。