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二胺氧化酶測試盒說明書

測定意義：DAO(EC1.4.3.6)廣泛存在于動物（腸粘膜、肺、肝臟、腎臟等）、植物和微生物中。催化多胺氧化為醛，其活性與核酸和蛋白合成密切相關(guān)，能夠反映腸道機械屏障的完整性和受損傷程度。

測定原理：DAO催化尸胺產(chǎn)生醛和過氧化氫，外源添加過量的辣根過氧化物酶，催化過氧化氫氧化鄰聯(lián)茴香胺生成有色物質(zhì)，在460nm處有特征吸收峰，通過測定該波長吸光度增加速率，計算DAO活性。

需要的儀器，耗材:天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。

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樣本處理
1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）進行 冰浴勻漿，然后10000g，4℃離心20min，取上清，置冰上待測。

2. 細菌、細胞：按照細胞數(shù)量（10 4個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL提 取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后10000g，4℃，離心10min， 取上清置于冰上待測。

3. 血清等液體：直接測定。