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果膠裂解酶測試盒分析說明書-測定

測定意義：果膠裂解酶（EC4.2.2.10）是果膠酶的重要組成部分，是一種能降解植物細(xì)胞壁，導(dǎo)致植物組織軟化甚至死亡的解聚酶，來源比較廣泛，主要來源于微生物，可用于果汁、果酒的澄清，提高水果出汁率，植物病毒的純化，紙漿的漂白和紡織品的生物精煉，在減少環(huán)境污染和降低能源消耗方面具有潛在的應(yīng)用價值。

測定原理：果膠裂解酶作用于果膠中的α-1,4糖苷鍵，生成在還原端C4和C5之間位置具有不飽和鍵的不飽和寡聚半乳糖醛酸，在235nm處有特征吸收峰。

需要的儀器，耗材:天平、低溫離心機、紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。

樣本處理
1．組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積（mL）為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液）， 進行冰浴勻漿。10000g ，4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

2．細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（10 4個）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細(xì)胞加入 1mL 提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時間 3min）；然后 10000g，4℃離心 10min， 取上清置于冰上待測。

3. 培養(yǎng)液：直接測定。