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土壤中性磷酸酶(S-NP)測(cè)試盒實(shí)驗(yàn)方法

測(cè)定意義：土壤磷酸酶是催化土壤有機(jī)磷礦化的酶，其活性的高低直接影響著土壤中有機(jī)磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性，是評(píng)價(jià)土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強(qiáng)度的指標(biāo)。磷酸酶活性受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH的顯著影響，根據(jù)最適PH范圍，一般把土壤磷酸酶分為中性、酸性和堿性三種類型。

測(cè)定原理：中性環(huán)境中，S-NP催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚和磷酸氫二鈉，通過測(cè)定酚的生成量即可計(jì)算出NP活性。

需要的儀器，耗材:紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺(tái)式離心機(jī)、37℃恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、蒸餾水、乙醇和甲苯。

土壤中性磷酸酶(S-NP)測(cè)試盒實(shí)驗(yàn)方法

樣本處理
稱取風(fēng)干混勻土壤約 0.1g，加入 0.05mL 甲苯（自備），輕搖 15min；加 0.4mL 試劑一并且搖勻后，置于 37℃ 恒溫培養(yǎng)箱，開始計(jì)時(shí)，催化反應(yīng) 24h；到時(shí)后迅速加入 1mL 試劑二充分混勻，以終止酶催化的反應(yīng)。10000rpm 室溫離心 10min，取上清液置于冰上待測(cè)。