快速熒光PCR |
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快速熒光PCR是目前特異性和靈敏度較高的檢測(cè)技術(shù)。PCR技術(shù)實(shí)際上是一種分子生物學(xué)技術(shù),通過(guò)放大特定的DNA或RNA(也可看作體外的特殊DNA復(fù)制),能快速得到患者體內(nèi)病毒或細(xì)菌的含量,為疾病的診斷和治療及療效動(dòng)態(tài)評(píng)估提供了有力的參考依據(jù)。它是通過(guò)熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性的探針,對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤,實(shí)時(shí)在線監(jiān)控反應(yīng)過(guò)程,結(jié)合相應(yīng)的軟件可以對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行分析,計(jì)算待測(cè)樣品模板的初始濃度。 原理: PCR擴(kuò)增時(shí)在加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時(shí),報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收;剛開始時(shí),探針結(jié)合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴(kuò)增時(shí),Taq酶的5'端-3'端外切酶活性將探針酶切降解,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào),即每擴(kuò)增一條DNA鏈,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步;蛘呤褂脽晒馊玖稀?梢越Y(jié)合到雙鏈DNA上面,當(dāng)體系中的模板被擴(kuò)增時(shí),可以有效結(jié)合到新合成的雙鏈上面,隨著PCR的進(jìn)行,結(jié)合的染料越來(lái)越多,被儀器檢測(cè)到的熒光信號(hào)越來(lái)越強(qiáng),從而達(dá)到定量的目的。 更多產(chǎn)品詳情請(qǐng)點(diǎn)擊: http://www.lumex.com.cn/SonList-2023363.html http://www.chem17.com/st392948/erlist_2023363.html |
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