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廠家直供植物二胺氧化酶(DAO)ELISA KIT
廠家直供植物二胺氧化酶(DAO)ELISA KIT 價格:198000  元(人民幣) 產(chǎn)地:本地
最少起訂量:1 發(fā)貨地:本地至全國
上架時間:2019-11-08 11:37:13 瀏覽量:43
上海朗頓生物科技有限公司  
經(jīng)營模式:其他 公司類型:生產(chǎn)加工
所屬行業(yè):綜合 主要客戶:全國
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聯(lián)系方式

聯(lián)系人:廖凱文 () 手機(jī):13045656500
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郵箱: 地址:上海市楊浦區(qū)大連路1548號

詳細(xì)介紹


植物二胺氧化酶(DAO)ELISA KIT 目的:本試劑盒用于測定植物組織,細(xì)胞及相關(guān)液體樣本中二胺氧化酶(DAO)的含量。

植物二胺氧化酶(DAO)ELISA KIT實(shí)驗(yàn)原理:
? 本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中植物二胺氧化酶(DAO)水平。
用純化的植物二胺氧化酶(DAO)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入二胺氧化酶(DAO),再與HRP標(biāo)記的二胺氧化酶(DAO)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。
TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。
顏色的深淺和樣品中的二胺氧化酶(DAO)呈正相關(guān)。
用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中植物二胺氧化酶(DAO)濃度。

植物二胺氧化酶(DAO)ELISA KIT試劑盒組成:
試劑盒組成?48孔配置?96孔配置?保存
說明書?1份?1份?
封板膜?2片(48)?2片(96)?
密封袋?1個?1個?
酶標(biāo)包被板?1×48?1×96?2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品:45ng/ml?0.5ml×1瓶?0.5ml×1瓶?2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液?1.5ml×1瓶?1.5ml×1瓶?2-8℃保存
酶標(biāo)試劑?3 ml×1瓶?6 ml×1瓶?2-8℃保存
樣品稀釋液?3 ml×1瓶?6 ml×1瓶?2-8℃保存
顯色劑A液?3 ml×1瓶?6 ml×1瓶?2-8℃保存
顯色劑B液?3 ml×1瓶?6 ml×1瓶?2-8℃保存
終止液?3ml×1瓶?6ml×1瓶?2-8℃保存
濃縮洗滌液?(20ml×20倍)×1瓶?(20ml×30倍)×1瓶?2-8℃保存

植物二胺氧化酶(DAO)ELISA KIT樣本處理及要求:
1 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
2 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟
1.?標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在第一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在第一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從第一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。
(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為30ng/ml,20ng/ml,10ng/ml,5ng/ml,2.5ng/ml)。

2.?加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。
在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。
加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3.?溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.?配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5.?洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6.?加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7.?溫育:操作同3。

8.?洗滌:操作同5。

9.?顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10.?終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11.?測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。
測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

注意事項(xiàng):
1.?試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2.?濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。

3.?各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。
一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

4.?請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。
如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5.?封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.?底物請避光保存。

7.?嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.?所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9.?本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。


?

計(jì)算:
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),???
在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD?????
值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋?????
倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)?????
準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值?????
代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋?????
倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
?????????????????
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(此圖僅供參考)

?

試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上。

2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和15%

檢測范圍:?????????????????????????????????????????????
0.5ng/ml -30ng/ml????????????????????????????????????
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保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6個月
二胺氧化酶,DAO,ELISA

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