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侖昌碩生物 ? ????????????大鼠膜聯(lián)蛋白A1（ANXA1）elisa試劑盒

? ?背景及目的: 代謝綜合征(Metabolic syndrome,Mets)的主要特點(diǎn)是胰島素抵抗,高血壓,中心型肥胖及高脂血癥,其發(fā)病率逐年升高且發(fā)病年齡趨于年輕化;代謝綜合征患者發(fā)生血栓栓塞性疾病及相關(guān)并發(fā)癥的概率明顯高于正常人群,但其具體發(fā)病機(jī)制尚未明確.代謝綜合征患者體內(nèi)抵抗素(Resistin,Re)水平明顯升高.本課題組前期在體實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)肥胖小鼠體內(nèi)抵抗素水平升高,升高的抵抗素可促進(jìn)小鼠靜脈血栓的形成,同時(shí)肥胖大鼠體內(nèi)纖溶酶原激活劑抑制物-1(Plasminogen activator inhibitor1,PAI-1)水平也升高.緊接著本課題組前期體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)抵抗素能促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞PAI-1表達(dá)水平的升高.因此,綜合體內(nèi)外實(shí)驗(yàn),我們推測(cè)抵抗素促進(jìn)血栓形成的過(guò)程可能與PAI-1有一定的關(guān)系.本研究通過(guò)PAI-1單克隆抗體(PAI-1Ab)抑制PAI-1蛋白活性,觀察外源性抵抗素作用后血栓的變化情況,直接驗(yàn)證PAI-1在抵抗素促進(jìn)小鼠靜脈血栓形成中的作用. )抵抗素組大鼠下腔靜脈PAI-1mRNA表達(dá)水平高于鹽水組(P<0.01),抵抗素 PAI-1Ab組大鼠下腔靜脈PAI-1mRNA表達(dá)水平高于鹽水 PAI-1Ab組(P<0.01). (5)抵抗素組大鼠下腔靜脈血栓內(nèi)纖維蛋白含量明顯多于鹽水組,抵抗素 PAI-1Ab組大鼠下腔靜脈血栓內(nèi)纖維蛋白含量明顯少于抵抗素組,鹽水 PAI-1Ab組血栓纖維蛋白含量少于鹽水組. 結(jié)論: 抵抗素可增加大鼠深靜脈血栓重量及長(zhǎng)度,促進(jìn)血栓形成.抵抗素可升高大鼠下腔靜脈內(nèi)皮PAI-1mRNA及血漿PAI-1蛋白水平.抑制PAI-1可減弱抵抗素的促進(jìn)深靜脈血栓形成作用,提示抵抗素促進(jìn)血栓形成部分是通過(guò)PAI-1發(fā)揮作用

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本文在實(shí)驗(yàn)大鼠仙臺(tái)病毒,肺炎病毒和肺支原體的ELISA檢測(cè)試劑盒方面開(kāi)展了研究.包括酶結(jié)合物的制備及工作濃度的選擇,抗原包被量的確定,正常大鼠血 清99可信限OD值范圍及陰性對(duì)照血清的標(biāo)化等.并在相同實(shí)驗(yàn)條件下,進(jìn)行了多次重復(fù)測(cè)定.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:試劑盒在敏感性,特異性和重復(fù)性方面均令人滿(mǎn) 意.與其它方法比較,ELISA試劑盒具有簡(jiǎn)便,快速,敏感等優(yōu)點(diǎn).通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠仙臺(tái)病毒,肺炎病毒和肺支原體的檢測(cè)發(fā)現(xiàn),在普通級(jí)大鼠中其感染率分別 為41,36和91,而在清潔級(jí)大鼠中未發(fā)現(xiàn)有這三種病原的感染.

本文在實(shí)驗(yàn)大鼠仙臺(tái)病毒、肺炎病毒和肺支原體的ELISA檢測(cè)試劑盒方面開(kāi)展了研究.包括酶結(jié)合物的制備及工作濃度的選擇,抗原包被量的確定,正常大鼠血清99可信限OD值范圍及陰性對(duì)照血清的標(biāo)化等。并在相同實(shí)驗(yàn)條件下,進(jìn)行了多次重復(fù)測(cè)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:試劑盒在敏感性、特異性和重復(fù)性方面均令人滿(mǎn)意。與其它方法比較,ELISA試劑盒具有簡(jiǎn)便、快速、敏感等優(yōu)點(diǎn)。通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠仙臺(tái)病毒、肺炎病毒和肺支原體的檢測(cè)發(fā)現(xiàn),在普通級(jí)大鼠中其感染率分別為41、36％和91,而在清潔級(jí)大鼠中未發(fā)現(xiàn)有這三種病原的感染。

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心血管疾病作為當(dāng)今世界上患病率和死亡率高的疾病,長(zhǎng)期以來(lái)受到研究人員的廣泛關(guān)注.而其中高血壓是心血管疾病重要的危險(xiǎn)因素之一.許多臨床試驗(yàn)顯示,糖尿病患者較正常人群具有較高心血管疾病患病率.同時(shí)分子生物學(xué)研究也證實(shí),Ⅱ型糖尿病和心血管疾病之間存在著密切的聯(lián)系.抵抗素Resistin作為在胰島素抵抗發(fā)生過(guò)程中的重要脂肪因子,被發(fā)現(xiàn)在高血壓以及其他一些心血管疾病患者血清內(nèi)具有較高的水平,成為研究糖尿病和心血管疾病之間相互關(guān)系的重要因子之一.近些年越來(lái)越多的研究表明,Resistin同炎癥狀態(tài)下的動(dòng)脈粥樣硬化,胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)下胰島素調(diào)節(jié)血管舒張能力受損以及內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂等等都有著密切的關(guān)系.但是關(guān)于Resistin同高血壓之間的關(guān)系以及相關(guān)的分子機(jī)理的直接研究并不是很多.本實(shí)驗(yàn)利用小鼠無(wú)創(chuàng)血壓儀對(duì)鼠尾血壓進(jìn)行測(cè)量證實(shí)Resistin連續(xù)處理6天可以引起小鼠體內(nèi)高血壓以及胰島素抵抗.隨后通過(guò)TLR4敲除模式小鼠,以及血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制劑培哚普利進(jìn)行小鼠灌胃,利用RT-PCR,ELISA,ChIP等實(shí)驗(yàn)技術(shù)對(duì)Resistin誘導(dǎo)小鼠高血壓的分子機(jī)理進(jìn)行探索.同時(shí)結(jié)合正常人群,糖尿病,高血壓以及糖尿病兼高血壓患者的血清檢驗(yàn)進(jìn)一步探討Resistin同糖尿病,高血壓之間的關(guān)系.

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