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? ? ? ? ? ? ? ?目的:Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)疾病是一類由IgE介導(dǎo)的過敏性疾病,主要包括支氣管,鼻炎,結(jié)膜炎等疾病.主要表現(xiàn)為大量表達(dá)Th2細(xì)胞因子,嗜酸粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞浸潤,同時(shí)引發(fā)炎性反應(yīng).近年來Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)性疾病的發(fā)病率明顯升高,其受重視程度日益增強(qiáng).Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)疾病是一種需要從多角度多層面綜合性治療的疾病,而現(xiàn)階段對(duì)其尚沒有完善治療方法,它已成為一個(gè)全球性健康問題.近期大量研究發(fā)現(xiàn)肥大細(xì)胞在Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)性炎癥發(fā)病機(jī)制的過程中貫穿始終,起核心作用.肥大細(xì)胞是速發(fā)型過敏反應(yīng)的初級(jí)效應(yīng)細(xì)胞,其激活直接影響次級(jí)效應(yīng)細(xì)胞—嗜酸性粒細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的募集和激活,是重要的調(diào)節(jié)性免疫細(xì)胞,是介導(dǎo)速發(fā)型過敏和炎癥的重要樞紐,能引發(fā)和擴(kuò)大炎癥反應(yīng).同時(shí),肥大細(xì)胞還參與了許多疾病和炎癥過程,特別是與一些變態(tài)反應(yīng)性疾病如蕁麻疹,銀屑病和系統(tǒng)性紅斑狼瘡的發(fā)生關(guān)系密切.但是對(duì)于肥大細(xì)胞活化的確切機(jī)制尚不清楚,調(diào)控肥大細(xì)胞活化的也大細(xì)胞活化初始階段的三種關(guān)鍵酪氨酸激蛋白酶(Lyn,Syk,Fyn)的膜轉(zhuǎn)移以及化的過程.3飽和滅菌水抑制肥大細(xì)胞活化的下游通路PI3K-AKT分子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的激活綜上所述,飽和滅菌水抑制了Anti-DNP-IgE誘導(dǎo)的肥大細(xì)胞活化,其機(jī)制有可能是通過調(diào)控肥大細(xì)胞活化初始階段三種酪氨酸激蛋白酶(Lyn,Syk,Fyn),繼而抑制了下游PI3K-AKT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的激活而實(shí)現(xiàn)的.

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?目的:探討鈣結(jié)合蛋白S100A4調(diào)節(jié)小鼠源肥大細(xì)胞(BMMC)活化的作用.方法:8~10周齡野生型(WT)和S100A4基因敲除(S100A4-/-) C57BL/6健康雄性小鼠各2只,取脛骨與股骨提取進(jìn)行源肥大細(xì)胞(BMMC)培養(yǎng)并鑒定;以成熟WT BMMC為模型細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)分為S100A4蛋白處理組(1 500μg/L S100A4蛋白)和鹽緩沖液(PBS)對(duì)照組(S100A4蛋白等量體積PBS),分別于培養(yǎng)第1,2及3周采用甲苯胺藍(lán)染色鑒定小鼠成熟BMMC,采用化學(xué)發(fā)光法檢測各組小鼠成熟BMMC中β-氨基己糖苷酶(β-hex)的吸光度(OD),采用流式細(xì)胞術(shù)檢測各組小鼠成熟BMMC的S100A4蛋白表達(dá)和白細(xì)胞介素-5(IL-5),白細(xì)胞介素-6(IL-6),白細(xì)胞介素-13(IL-13)及腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的熒光強(qiáng)度并計(jì)算相對(duì)熒光指數(shù)(r FI);以成熟WT和S100A4-/-BMMC為模型細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)分為WT離子霉素(ION)處理組(1 500μg/L ION),WT PBS對(duì)照組(ION等量體積PBS),S100A4-/-ION處理組(1 500μg/L ION)及S100A4-/-PBS對(duì)照組(ION等量體積PBS),采用化學(xué)發(fā)光法檢測各組小鼠成熟BMMC中平均低于WT ION處理組(P <0. 05).結(jié)論:S100A4蛋白能夠直接誘導(dǎo)成熟BMMC活化,S100A4基因的缺失可抑制成熟BMMC活化及炎性因子的產(chǎn)生.

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