菌落總數(shù)的定義是水樣在營養(yǎng)瓊脂上有氧條件下37℃培養(yǎng)48h后,所得1mL水樣所含菌落的總數(shù)。細(xì)菌總數(shù)是用來評價水質(zhì)污染程度的一個重要衛(wèi)生指標(biāo)，其檢測值越高，則說明水質(zhì)被污染程度越高。
以下是水質(zhì)中菌落總數(shù)的檢測方法--平皿計數(shù)法
1.儀器與試劑
高壓蒸汽滅菌鍋、培養(yǎng)箱、超凈工作臺、培養(yǎng)基（營養(yǎng)瓊脂）
2.操作步驟
(1)把所有待用品（1ml刻度吸管、平皿、三角瓶、培養(yǎng)基、生理鹽水等）包扎好，放入高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，經(jīng)103.43kPa(121℃,15lb)滅菌20min。
(2)滅菌完畢后，通過傳送窗口，把所用品放置于無菌室的超凈工作臺上，平攤開來。（無菌室需提前開啟紫外燈進(jìn)行滅菌1h，關(guān)閉紫外燈后至少1h后方可進(jìn)入）
(3)在平皿底部做好樣品標(biāo)識。
(4)在超凈工作臺上，酒精燈旁，用1ml的刻度吸管吸取1ml的試樣，注入至裝有9ml生理鹽水的試管中，混勻成1:10稀釋液。同理，用另外一支1ml刻度吸管吸取1:10稀釋液1ml，注入至裝有9ml生理鹽水的試管中，混勻，此溶液變成1:100稀釋液。
(5)分別用3支干凈的1ml刻度吸管移取原試樣、1:10稀釋液、1:100稀釋液 1ml于平皿內(nèi)。（每個稀釋梯度都做至少一個平行樣）
(6)移取15ml 45℃左右的培養(yǎng)基注入至平皿中，并立即左右平旋平皿，使得試樣與培養(yǎng)基充分混勻。同時，做一組空白對照（未加試樣，只有培養(yǎng)基）
(7)待培養(yǎng)基凝固后，翻轉(zhuǎn)平皿，使得帶有標(biāo)識的底面向上，放置于36℃±1℃的培養(yǎng)箱內(nèi)連續(xù)培養(yǎng)48h。
(8)培養(yǎng)48h后，記錄個平皿中的菌落數(shù)，求出同稀釋度的平均菌落數(shù)。必要時可用放大鏡檢查，以防遺漏。
(9)實(shí)測值得報告方法
①平均菌落數(shù)在30~300間的,若只有一個稀釋度的平均菌落數(shù)符合此范圍時,則將該菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。
②若有兩個稀釋度,其生長的菌落數(shù)均在30~300之間,則視二者之比值來決定,若其比值小于2應(yīng)報告兩者的平均數(shù)。若大于2則報告其中稀釋度較小的菌落總數(shù)。若等于2亦報告其中稀釋度較小的菌落數(shù)。
③若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300,則應(yīng)按稀釋度高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。
④若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30,則應(yīng)以按稀釋度低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。
⑤若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30~300之間,則應(yīng)以最接近30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。
⑥若所有稀釋度的平板上均無菌落生長,則以未檢出報告之。
⑦如果所有平板上都菌落密布,不要用“多不可計”報告,而應(yīng)在稀釋度大的平板上,任意數(shù)其中2個平板1cm2中的菌落數(shù),除2求出每平方厘米內(nèi)平均菌落數(shù),乘以皿底面積63.6cm2,再乘其稀釋倍數(shù)作報告。
⑧菌落計數(shù)的報告:菌落數(shù)在100以內(nèi)時按實(shí)有數(shù)報告,大于100時,采用兩位有效數(shù)字,在兩位有效數(shù)字后面的數(shù)值,以四舍五入方法計算,為了縮短數(shù)字后面的零數(shù)也可用10的指數(shù)來表示。
